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微生物質(zhì)譜鑒定微生物的基本流程

更新時(shí)間:2022-06-23      點(diǎn)擊次數:2528
  微生物質(zhì)譜一般由進(jìn)樣系統、離子源、質(zhì)量分析器、檢測器、數據處理系統等部分組成。由于進(jìn)樣方式、離子源、質(zhì)量分析器等的不同,質(zhì)譜儀分為不同的種類(lèi),臨床上常見(jiàn)的有液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜(LC-MS-MS)、氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜(GC-MS-MS)、電感耦合等離子體質(zhì)譜(ICP-MS)、基質(zhì)輔助激光解吸電離飛行時(shí)間質(zhì)譜(MALDI-TOFMS)等等。
 
  微生物質(zhì)譜質(zhì)譜分析是一種通過(guò)測量離子質(zhì)荷比(質(zhì)量-電荷比),從而確定其質(zhì)量的分析方法,通俗點(diǎn)講,質(zhì)譜就是一種類(lèi)型的“秤”,只不過(guò)它稱(chēng)量的是離子的質(zhì)量,在眾多的分析測試方法中被認為是一種同時(shí)具備高特異性和高靈敏度且得到了廣泛應用的普適性方法。
 
  用一定強度的激光照射樣品與基質(zhì)形成的共結晶薄膜,基質(zhì)從激光中吸收能量,與樣品之間發(fā)生電荷轉移使得樣品分子電離。離子在高壓電場(chǎng)作用下加速進(jìn)入飛行管中,小離子飛得快,先到達探測器,大離子飛得慢,后到達探測器,從而得出測定結果。
 
  鑒定微生物基本流程是,將微生物純培養后,點(diǎn)靶加釋放液,微生物經(jīng)過(guò)釋放液充分處理后,可使得細胞內的蛋白成分更好地釋放出來(lái),待溶劑揮發(fā)后加基質(zhì),蛋白分子與基質(zhì)形成基質(zhì)結晶,上質(zhì)譜檢測。
 
  在質(zhì)譜儀中,樣品通過(guò)有效的電離將不同質(zhì)荷比(m/z)的離子分開(kāi)形成微生物特異性的清晰的指紋圖譜,通過(guò)分析關(guān)鍵的質(zhì)譜峰數據,與數據庫中的已知菌種譜圖進(jìn)行比對,即可快速得到微生物鑒定結果。
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